Лабораторная диагностика
Отдел общеклинических исследований и иммуноцитометрии
В этом подразделении проводятся общеклиническое исследование крови и мочи и оценка иммунного статуса.
Общий анализ мочи проводится с помощью автоматического анализатора CLINITEK 500 (Bayer HealtCare).
Исследование включает в себя:
- оценка физических свойств мочи(цвета, прозрачности);
- определение рН мочи;
- определение удельного веса мочи;
- полуколичественное определение содержания белка;
- полуколичественное определение содержания глюкозы;
- полуколичественное определение содержания билирубина;
- полуколичественное определение содержания кетонов;
- полуколичественное определение содержания нитритов;
- полуколичественное определение содержания уробилиногена;
- полуколичественное определение содержания эритроцитов;
- полуколичественное определение содержания лейкоцитов.
Общий анализ крови полностью автоматизирован и проводится на гематологических анализаторах.
Для бесперебойной работы лаборатория оснащена двумя взаимозаменяемыми моделями производства фирмы Labix diagnoctics (Франция).
Анализатор АВХ Pentra 60 является полностью автоматизированным гематологическим анализатором для диагностики проб цельной крови in vitro. Он может работать в режиме СВС+5DIFF (подсчет клеток крови с дифференциацией лейкоцитарной формулы) и определяет 26 параметров анализа крови.
Анализатор АВХ MICROS 60-СТ/ОТ также является полностью автоматизированным гематологическим анализатором для диагностики in vitro, с использованием образцов цельной крови, тромбоцитарной массы и концентратов компонентов цельной крови. На анализаторе можно проводить измерение 18 параметров.
В сложных диагностических ситуациях проводится дополнительное исследование лейкоцитарной формулы врачом-специалистом. Микроскопия гематологического мазка осуществляется с помощью бинокулярных микроскопов (модель СХ21) фирмы OLYMPUS corporation (Япония).
Для стандартизации и избежания погрешностей при подготовке мазка крови к исследованию окраска препаратов выполняется на аппарате для окраски предметных стекол Hema - Tek (Bayer Diagnostics).
Измерение скорости оседания эритроцитов также проводится автоматизированно, на специальном анализаторе Ves matic 20 (Diesse Diagnostica Senese, Италия).
Особенностью методики, основанной на методе Вестергрена, является намного больший диапазон измерения по сравнению с устаревшим методом измерения СОЭ в капиллярах Панченкова, что делает возможным получение истинных значений СОЭ (до 200 мм/ч), без ложного занижения результата.
Таким образом, общеклинический анализ крови, проведенный в лаборатории, включает в себя следующие показатели (в 1 кубическом миллиметре крови):
- ПОКАЗАТЕЛИ КРАСНОЙ КРОВИ:
- концентрация эритроцитов (RBC);
- концентрация гемоглобина (HGB);
- измерение гематокрита (HCT);
- измерение среднего объема эритроцита (MCV);
- среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH);
- средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC);
- ширина распределения эритроцитов (RDW).
- ИССЛЕДОВАНИЕ ТРОМБОЦИТОВ:
- концентрация тромбоцитов (PLT);
- измерение среднего объема тромбоцита (MPV);
- расчет тромбокрита (РСТ).
- ПОКАЗАТЕЛИ БЕЛОЙ КРОВИ:
- концентрация лейкоцитов (WBC);
- дифференциация лейкоцитарной формулы;
- с определением концентрации и расчетом процентного соотношения лимфоцитов (LYM), нейтрофилов (NEU), базофилов (BAS), эозинофилов (EOS), моноцитов (MON).
- Исследование РЕТИКУЛОЦИТОВ проводится врачом-специалистом при микроскопии.
- Измерение СКОРОСТИ ОСЕДАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ (СОЭ).
Анализ КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА проводится методом проточной иммуноцитофлуорометрии.
Это высокотехнологичное современное исследование с определением фенотипа отдельных клеточных популяций. Практически все этапы анализа автоматизированы.
Лаборатория оснащена оборудованием производства фирмы Bector Dickinson (США). Цитометры BD выгодно отличаются от моделей других фирм-производителей наличием функции автоматического гейтирования, что значительно повышает точность определения.
Предварительная пробоподготовка проводится на автоматическом модуле Sample Prep Assistant II.
Основной объем исследований делается на проточном цитометре FACS Calibur, дополнительно оснащенном модулем автоматической загрузки проб.
Данная модель цитометра позволяет определять широкую панель СД-маркеров и большой спектр показателей гуморального иммунитета.
В лаборатории востребовано определение СД-маркеров субпопуляций лимфоцитов (с подсчетом абсолютного количества и процентного соотношения клеток): СД 45 (лейкоциты), СДЗ (лимфоциты), СД4 (Т-хелперы), СД8 (Т-супрессоры), СД19 (В-лимфоциты) и СД16/56 (NK-клетки).
Для экспресс-исследований у ВИЧ-инфицированных пациентов (панель СД4/СД8) используется проточный цитометр FACS Count.
Для автоматизации и эргономизации мелких манипуляций и промежуточных этапов работы Отдел общеклинических исследований и иммуноцитометрии оснащен также достаточным количеством вспомогательного оборудования: вортексы, ротаторы-миксеры, электронные пипетки и электронные дозаторы-степперы (BRAND, Германия), центрифуги и холодильные шкафы.
Для контроля качества получаемых результатов проводится построение контрольных карт при определении количественных показателей (гемоглобин, СОЭ); отдел участвует в Федеральной Системе внешнейоценки качества лабораторных исследований и в Системе оценки качества исследований фирмы Becton Dickinson.
Биохимическая лаборатория
Лаборатория оснащена современным оборудованием для определения широкого спектра параметров клинической биохимии:
-
автоматический биохимический анализатор "Konelab 20XTi" фирмы "ThermoScientific"
-
автоматический анализатор "сухой химии' для экспресс-исследований "Reflotron Plus" фирмы "Roche"
-
центрифуги с охлаждением "Hettich"
в лаборатории могут выполняться любые биохимические исследования, в том числе:
- исследование углеводного обмена:
- определение уровня глюкозы в крови;
- определение уровня гликозилированного гемоглобина;
- исследование функций внутренних органов:
- уровень общего белка и альбумина
- уровень общего билирубина и его фракций
- уровень креатинина, мочевины
- концентрация мочевой кислоты
- исследование активности ферментов:
- аланинаминотрансферазы (АЛТ)
- аспартатаминотрансферазы (АСТ)
- гамма-глутамилтранспептидазы (ГГТ)
- креатинфосфокиназы (КФК)
- лактатдегидрогеназы (ЛДГ)
- щелочной фосфатазы (ЩФ)
- исследование активности блока ферментов для оценки функции поджелудочной железы:
- амилазы общей
- амилазы панкреатической
- липазы
- липидограмма (оценка обмена жиров):
- холестерин
- липопротеиды высокой плотности (ЛПВП-холестерин)
- липопротеиды низкой плотности (ЛПНП-холестерин)
- липопротеиды очень низкой плотности (ЛПОНП-холестерин)
- триглицериды
- расчет индекса атерогенности
- исследование уровня железа в сыворотке крови (диагностики анемии)
- исследование показателей минерального обмена:
- концентрация калия
- концентрация кальция
- концентрация магния
- концентрация фосфора
- исследование концентрации отдельных специфических белков количественное определение турбидиметрическим методом):
- С-реактивный белок
- антистрептолизин-о
- ревматоидный фактор
- иммуноглобулины классов А, М, G
Особое внимание уделяется качеству проводимых исследований, достоверности получаемых результатов, проводится построение контрольных карт для всех определяемых показателей. Результаты исследований оцениваются в Федеральной Системе внешней оценки качества (ФСВОК).
Отдел молекулярных методов исследования
В этом подразделении проводятся современные высокотехнологичные исследования для выявления и количественного определения генетического материала возбудителей различных инфекций.
В лаборатории представлены следующие виды молекулярных исследований: полимеразная цепная реакция (ПЦР), метод выявления разветвленной нуклеиновой кислоты и ДНК-сегментирование.
Постановка ПЦР полностью автоматизирована, детекция результатов проводится с помощью флуоресцентной метки в режиме реального времени (ПЦР-КТ). Для постановки ПЦР лаборатория оснащена автоматической станцией для выделения нуклеиновых кислот (I этап) Freedom evo (ТЕСАN, Швейцария) и несколькими амплификаторами (II и Ш этап) планшетного и роторного типа: Rotor-Cene Q (QIAGEN, Германия), DTprime 4 (ДНК-технология, РФ), m2000 rt (Abbott, США).
Методом ПЦР проводится:
-
выявление провирусной ДНК вируса иммунодефицита человека (для ранней диагностики инфекции);
-
выявление РНК ВИЧ и количественное определение вируса - оценка вирусной нагрузки (для диагностики и мониторинга терапии);
-
выявление аллели HLA B*5701 (для выявления гиперчувствительности к абаковиру);
-
выявление РНК вируса гепатита С и определение вирусной нагрузки;
-
определение генотипа вируса гепатита С;
-
выявление ДНК вируса гепатита В и определение вирусной нагрузки;
-
выявление ДНК цитомегаловируса;
-
выявление ДНК возбудителя токсоплазмоза.
Метод амплификации разветвтленной ДНК (РНК) представлен запатентованной технологией VERSANT фирмы SIEMENS. Это полуавтоматический (VERSANT 340) и полностью автоматизированный (VERSANT 440) комплексы для работы в микропланшетном формате с хемилюминисцентной детекцией результата. Метод применяется для качественного и количественного исследования «трех китов»: вируса иммунодефицита человека, вирусов гепатитов В и С.
Для выявления мутаций вируса иммунодефицита человека, от которых зависит устойчивость вируса к антиретровирусным препаратам в лаборатории проводится генотипирование ВИЧ-1 с помощью запатентованной системы TRUGENE фирмы SIEMENS (ДНК-секвенирование).
Для качественной и эффективной предварительной обработки и хранения исследуемых образцов лаборатория оснащена современным вспомогательным оборудованием: центрифуги с охлаждением (Hettich, Германия) для ультрацентрифугирования, морозильные шкафы для хранения образцов при -80 градусах (Snijders scientific, Голландия, и SANYO, Япония), ламинарные шкафы KOJAIR (Финляндия).
Для оценки достоверности получаемых результатов по профильным видам исследований лаборатория участвует в Федеральной Системе внешней оценки качества лабораторных исследований.